Авторы: Семенов Б.С., Кузнецова Т.Ш., Гусева В.А.
Plasmolifting-animal, тромбоцитарная аутоплазма, тромбоциты, факторы роста, лошади.
АННОТАЦИЯ. Plasmolifting-animal – современная технология приготовления тромбоцитарной аутоплазмы, применение которой способствует ускорению регенерации повреждённых тканей животного и оказывает противовоспалительное действие. Эффективность применения тромбоцитарной аутоплазмы доказана как в экспериментальных случаях, так и в практической работе.
SUMMARY. Plasmolifting-animal is a modern technology of the preparation of the autological platelets plasma, the application of which helps to speed up the regeneration of the damaged tissues of the animal and makes an anti-inflammatory effect. The efficiency of using the autological platelets plasma was proved in the experimental data, as well as in practice.
Технология Plasmolifting-animal – новый, современный, удобный и безопасный способ приготовления тромбоцитарной аутоплазмы. Ветеринарные врачи, специализирующиеся на болезнях лошадей, применяют обогащённую тромбоцитами плазму для лечения травм сухожилий [4, 5]. Однако область применения тромбоцитарной аутоплазмы намного шире.
Технология Plasmolifting-animal отличается от общепринятого метода применения обогащённой тромбоцитами плазмы тем, что не требует двойного центрифугирования и добавления активаторов, а также в полученной плазме количество тромбоцитов находится в референтном диапазоне для данного вида животного. По мнению разработчиков технологии Plasmolifting™ для гуманной медицины Р.Р. Ахмерова и Р.Ф. Зарудия, нет необходимости в концентрировании тромбоцитов, а можно использовать увеличенный объём вводимой плазмы [1].
На основании технологии Plasmolifting™ на базе кафедры акушерства и оперативной хирургии ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ» разрабатывается технология Plasmolifting-animal, основанная на проведении опытов по исследованию эффективности применения тромбоцитарной аутоплазмы у животных. Концентрация тромбоцитов в аутоплазме, полученной по технологии Plasmolifting-animal, составляла 189 ± 32,07 × 109/л.
Активировать тромбоциты также не требуется, поскольку в специализированных пробирках содержится антикоагулянт – натриевый гепарин высокой степени очистки.
Сначала были проведены опыты по лечению экспериментальных ран у лошадей. В эксперименте лошадям наносили раны в области шеи под гривой, площадь раневой поверхности составляла 5 см2. Животные были разделены на две группы, в каждой группе было по 10 голов. Раны у лошадей контрольной группы лечили общепринятыми методами, а экспериментальной – с применением технологии Plasmolifting-animal.
После лечения экспериментальных ран были сделаны выводы, что применение тромбоцитарной аутоплазмы ускоряет процессы регенерации, способствует заживлению ран у лошадей; тромбоцитарная аутоплазма также способствует купированию гнойно-экссудативного процесса в ранах у лошадей [2, 3]. Данные были подтверждены гистологическими и цитологическими исследованиями, которые подтвердили данные визуального наблюдения.
После подтверждения эффективности тромбоцитарной аутоплазмы в эксперименте мы стали применять её на практике. Подробно о некоторых клинических случаях расскажем в этой статье.
Механизм действия основывается на том, что тромбоцитарная аутоплазма ускоряет регенерацию тканей и оказывает противовоспалительное действие. Ускорение регенерации тканей достигается за счёт действия биологически активных веществ, содержащихся в альфа-гранулах тромбоцитов (тромбоцитарный фактор роста, трансформирующий фактор роста, фактор роста фибробластов, фактор роста эндотелия сосудов, инсулиноподобный фактор роста, эпидермальный фактор роста и др.; табл. 2) и в бета-гранулах тромбоцитов медиаторов (серотонин, гистамин, АДФ и АТФ; табл. 3). Противовоспалительный эффект действия тромбоцитарной аутоплазмы достигается за счёт наличия в тромбоцитах и плазме крови лизоцима и медиаторов бета-гранул [1].
Биологически активные вещества во всём своём разнообразии и многофункциональности воздействуют на все стадии регенеративных процессов и позволяют оказывать противовоспалительный эффект, что объясняет высокую эффективность лечения тромбоцитарной аутоплазмой.
Для лечения лошадей с раной в области седалищного бугра, с потёртостью от амуниции и с гнойным бурситом в области правого локтевого бугра применяли тромбоцитарную аутоплазму в комплексе с другими препаратами.
Для получения тромбоцитарной аутоплазмы использовали специализированные пробирки Плазмолифтинг-Анимал (Россия) с разделительным гелем. Кровь у лошадей брали из яремной вены в пробирку в объёме 8 мл, затем центрифугировали со скоростью 2500 оборотов в минуту в течение 5 минут (центрифуга СМ‑6 ELMI, Латвия). В результате центрифугирования плазма и тромбоциты остаются над разделительным гелем, а другие форменные элементы остаются под ним.
Далее тромбоцитарную аутоплазму извлекали в шприц и вводили животному в места повреждения. Для каждой лошади схема лечения подбиралась индивидуально.
| Факторы роста | Функции факторов роста |
|---|---|
| Тромбоцитарный фактор роста | Отвечает за дифференцирование стволовых клеток и усиливает метаболизм костной ткани и ангиогенез, является стимулятором репарации тканей. |
| Эпидермальный фактор роста | Стимулирует пролиферацию фибробластов и остеобластов. Стимулирует синтез фибриногенектина. Побуждает клеточный рост и дифференцировку эпителиального покрова. |
| Инсулиноподобный фактор роста | Регуляция процессов роста, развития и дифференцировки клеток. Синтез коллагена. Стимулирует метаболизм костной ткани и дифференцирование стволовых клеток. |
| «Семейство» трансформирующего фактора роста | Контроль пролиферации и дифференцировки клеток. Стимулирует ангиогенез. Синтез коллагена. Обладают несколькими функциями. Индуцируют дифференцирование мезенхимальных клеток. Отвечают за продукцию других факторов роста. |
| Фактор роста фибробластов | Вызывает экспрессию в костной ткани, ангиогенез, участвует в оссификации. Индуцирует продукцию «семейства» трансформирующего фактора роста. |
| Фактор роста эндотелия сосудов | Всего 4 вида: A, B, C и D. Стимулируют ангиогенез и индуцируют пролиферацию эндотелиальных клеток сосудов. |
| Фактор роста эндотелиальных клеток | Поддерживает целостность кровеносных сосудов. Оказывает стимулирующее действие на эндотелиальные клетки и обладает ангиогенным эффектом. |
| Плацентарные факторы роста | Стимулируют действие фактора роста эндотелия сосудов. Улучшают проницаемость сосудов. |
| Остеонектин | Регулирует пролиферацию и взаимодействие клеток с матриксом. Связывается с в‑цепью тромбоцитарного фактора роста. |
| Фибронектин | Стимулирует клеточный рост, миграцию и дифференциацию клеток, связывается с агрегирующимися проколлагеновыми фибриллами и меняет кинетику образования фибрилл в прецеллюлярном матриксе. |
| Тромбоспондин | Опосредует адгезию костных клеток. |
Мерин по кличке Благополучный (рис. 1), диагноз: гнойный бурсит в области локтевого бугра. Бурсит лечили традиционными методами: проводили вскрытие полости бурсы и дренирование, применяли системную и местную антибиотикотерапию, промывание полости гипертоническими растворами. После проведённого лечения гнойного бурсита в области локтевого бугра в течение года сохранялся свищевой канал с рецидивирующей гнойной инфекцией (рис. 2). Было принято решение провести лечение тромбоцитарной аутоплазмой, которую вводили в объёме 20 мл: 10 мл в полость свищевого канала и 10 мл в стенку свищевого канала (по 5 мл). Всего было сделано 2 лечебные процедуры с интервалом в 2 недели.
Через 5 суток после последней обработки тромбоцитарной аутоплазмой свищевой канал закрылся, и гнойная инфекция была полностью устранена (рис. 3). В области поражения остался незначительный косметический дефект, который для лошади, работающей в прокате, значения не имеет. Данный клинический случай демонстрирует, что применение тромбоцитарной аутоплазмы в виде инъекций способствует ускорению регенерации и оказывает противовоспалительное действие.
Рис. 1. Мерин Благополучный, Рис. 2а. Свищевой канал (фрагмент), Рис. 2б. Свищевой канал (фрагмент), Рис. 3. Состояние после лечения (заживление).
В другом клиническом случае тромбоцитарную аутоплазму использовали в виде аппликации. У мерина Дмитрия (рис. 4) наблюдали потёртость в области спины (рис. 5) из‑за неправильно подобранного седла. Ориентировочно площадь поражённой поверхности кожи составляла 400 см2. Тромбоцитарную аутоплазму наносили в виде аппликаций по всей поражённой поверхности в объёме 20 мл. Всего было сделано 3 процедуры с интервалом трое суток.
Дополнительно применяли аэрозоль для обработки раневой поверхности с алюминием и экстрактом подорожника и чистотела. В результате лечения произошло заживление потёртости и восстановление шерстного покрова (рис. 6).
Рис. 4. Мерин Дмитрий, Рис. 5. Потёртость в области спины, Рис. 6. Заживление и восстановление шерстного покрова.
У кобылы Метель (рис. 7) лечили резано‑рваную рану площадью 121 см2 в области седалищного бугра. Глубина раны была 2,5–3 см, в ране наблюдали обильный гнойный экссудат (рис. 8). После удаления гнойного экссудата раневая поверхность имела цвет от светло‑розового до бордового, края раны неровные, эпидермальный ободок отсутствовал, имелись очаги грануляционной ткани.
Тромбоцитарную аутоплазму вводили в объёме 15 мл на границе раневой поверхности и здоровой кожи, распределив полученный объём на 4 инъекции. Аутоплазму инъецировали в пределах здоровой кожи по направлению под дно раны на глубину 1–1,5 см. Тромбоцитарную аутоплазму вводили 1 раз в 7 суток, всего 4 раза.
Через сутки после первого введения тромбоцитарной аутоплазмы гнойный процесс был купирован (рис. 9), рецидивов не наблюдалось. Через 30 суток от начала лечения наблюдали уменьшение площади раневой поверхности на 50%, и она составила 58 см2 (рис. 10). Результаты, полученные в этом клиническом случае, коррелируют с данными лечения экспериментальных кожных ран у лошадей с применением тромбоцитарной аутоплазмы [2].
Рис. 7. Кобыла Метель, Рис. 8. Резано‑рваная рана (обильный гнойный экссудат), Рис. 9. Состояние после начала лечения (купирование гнойного процесса), Рис. 10. Динамика заживления (уменьшение площади раны).
| Медиаторы | Функции медиаторов |
|---|---|
| Серотонин | Вазоконстрикция, увеличение проницаемости капилляров, привлечение макрофагов. |
| Гистамин | Повышает проницаемость капилляров. Привлекает и активирует макрофаги. |
| АДФ (аденозиндифосфат) | Ингибирует агрегацию тромбоцитов. |
| АТФ (аденозинтрифосфат) | Принимает участие в реакции тромбоцитов при взаимодействии их с коллагеном. |
Таким образом, все представленные результаты лечения являются предварительными, демонстрируют высокую эффективность применения тромбоцитарной аутоплазмы в дерматологии, лечении ран и гнойных бурситов у лошадей. Использование технологии Plasmolifting-animal актуально в практической ветеринарной медицине, так как данный метод безопасен, аутологичен, гипоаллергенен, а также позволяет сократить курс антибиотикотерапии.
Источник: распознавание текста по предоставленным изображениям страниц журнала VetPharma (№4, сентябрь 2015).
EN